DB53∕T 1276-2024 山药茎尖组织培养种苗繁育技术规程(云南省)
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ID： |
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文件大小(MB)： |
1.01 |
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14 |
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日期： |
2024/9/4 |
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ICS 6502020,CCS B21 □B53,云 南 省 地 方 标 准,DB53/T 1276—2024,山药茎尖组织培养种苗繁育技术规程,2024 -05-08 发布2024 -08-08 实施,云南省市场监督管理局 发布,DB53/T 1 276—2024,ヽ / —1—,刖 百,本文件按照GB/T 11-2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定,起草,请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任,本文件由云南农业大学提出,本文件由云南省农业标准化技术委员会（YNTC07）归口,本文件起草单位:云南农业大学、富源县经济作物技术推广站、富源县谷子地种植农民专业合作社,本文件主要起草人:龙雯虹、施令祥、段延碧、徐升胜、陈佩、兰平秀、王仕玉、郑玉屏、耿辉、,程园、敖纯,I,DB53/T 1 276—2024,山药茎尖组织培养种苗繁育技术规程,1范围,本文件规定了山药(。〇scorea 〇加。s/勿)茎尖组织培养与脱毒试管苗繁育的设备设施、化学试剂、培,养基、茎尖组织培养、病毒检验、脱毒苗继代增殖培养、生根培养、苗炼苗等技术要求,本文件适用于山药茎尖组织培养及脱毒试管苗繁育,2规范性引用文件,下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本,文件,GB 19489实验室生物安全通用要求,GB/T 22278良好实验室规范原则,3术语和定义,下列术语和定义适用于本文件,31,茎尖组织培养Shoot t i p cu I ture,简称茎尖培养,切取茎尖分生组织,进行离体培养的过程,32,茎尖组培苗 PI ant I ets from shoot t i p cu Iture,切取茎尖分生组织进行离体培养后获得的组培苗,在本文件中特指经检测不携带山药斑驳病毒,(YM0V)、山药温和花叶病毒(YMMV)、日本山药花叶病毒(JYMV)和山药褪绿坏死病毒(YCNV)等病,毒病的山药组培苗,4缩略语,下列缩略语适用于本文件,MS： MS培养基(Murashige & Skoog medium),AC：活性炭(Activated carbon),6-BA： 6ー茉基腺口票吟(6-Benzylaminopurine),NAA:蔡乙酸(Naphthy 1 acetic acid),RNA:核糖核酸(Ribonucleic acid),cDNA:互补脱氧核糖核酸(Complementary DNA),PCR:聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction),5实验室、仪器设备与试剂,1,DB53/T 1276—2024,51实验室,符合GB 19489和GB/T 22278的规定,5.2 仪器设备,高压灭菌锅、分析天平、空调、超净工作台、解剖镜、高速冷冻离心机、PCR仪、电泳仪、超纯水,机、接种针、手术刀、培养架、光温监控装置、紫外透射仪等,5.3 试剂,山药茎尖组织培养种苗快繁常用化学试剂类别和等级见附录A表A.1。病毒检测常用化学试剂见附录,A表A2,6培养基,6.1 培养基配方,6.1.1 诱导芽萌发培养基,MS + 6-BA 05 mg/L + NAA 1.5 mg/嫌^#〇 倒聶贏 g/I^jg 012 g/L,6.1.2 继代增殖培养基 ア/ 、債"1,MS + 6-BA 1 mg/L + NAA g/14^^7 g7o I,3生根培养基底ヒ1 ■,62培养基配制權Aaノ麻/,6.2.1诱导芽萌发培养基配制,各个成分按611中的配方丒利励氷、54m%L的NaOH或HC1将培养基的pH值调到58.,6.0后分 装到组培瓶中（培养基厚丒^Z f,6.2.2 继代增殖培养基配制 魅!’,培养基的各个成分按61.2中的配片、’,加緬水号皆用1 mol/L的NaOH或HC1将培养基的pH值,调至58.6.0后分装到组培瓶中（培养基,6.2.3 生根培养基配制,培养基的各个成分按61.3中的配方量取,加蒸储水定容,用1 mol/L的NaOH或HC1将培养基的pH值,调至58.6.0后分装到组培瓶中（培养基厚度为1cm）,63培养基灭菌,将装有培养基的组培瓶放入高压灭菌锅,在温度121 ℃、压カ0105 MPa的条件下保持20 min,7茎尖组织培养,2,DB53/T 1 276—2024,7I母体选择,选择品种特征典型、表型稳定的植株,并进行标记,7.2 繁殖材料的采收保存,72.1被标记植株藤蔓上的珠芽（俗称零余子或山药蛋）成熟时,采收珠芽,72.2或者当植株枯黄,地下块茎充分长大时,采收地下块茎,72.3将采收的珠芽或块茎进行2 d.4 d晾晒后,置于通风、干燥的室内保存,7.3 育苗与取材,7.3.1 当珠芽萌芽时,将珠芽播种于底部有排水孔的托盘或盆里,盖上干净、疏松的基质,保持基质,湿润,放在25 ℃.30 ℃的条件下培养。 JU**,ゴヌ,底部有排水孔的托盘或盆里,盖J基质年軫科超.30 ℃的条件下培养,7.3.3 待山药苗长至20cm.*ぽワ,』最顶部娜修。^^ \,7.4 消毒,741接种室 ，ペマ/ \ 1,7.42实验准备 丒 ［口1丒,742.1打开超净工作台［外绿ヮ菌o myio,74.2.2超净工作台开机.浦0B峋mln, 菌,培纠メ无,水、培养皿、镜子、手术刀,以及解剖镜、酒精灯、计咻、记鬢*由/ごI ,74, 23解剖镜用75%酒看出赳叫亩^,74.3材料……
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